一、食用菌母種培養基的滅菌方法
在食用菌母種培養基制作中常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法，該法滅菌較為徹底，具體方法步驟及注意事項如下：
1.選鍋、加水
選用手提式高壓蒸汽滅菌鍋，向滅菌鍋內加水至水位標記高度。注意：水不可過多也不可過少，過少易燒干，過多棉塞易受潮，引起雜菌污染。
2.裝入培養基
把培養基有序豎直排放入滅菌鍋內，留開通氣孔，并保證蒸汽流通。試管口和棉塞不能直接接觸鍋壁，上面要蓋2層報紙或1層防水油紙，防止鍋蓋下面的冷凝水打濕棉塞。
最后均勻擰緊鍋蓋上的螺絲，防止漏氣。
3.加熱滅菌
將裝入培養基的滅菌鍋放置在2-3千瓦的電爐上進行加熱，當壓力升至0.05兆帕時，打開放氣閥緩慢放氣，讓壓力降至零，再放氣10-15分鐘，當有大量熱蒸汽排出時，關閉放氣閥升壓滅菌。
當壓力升至0.11-0.12兆帕時，開始計時，并調節火力大小，始終維持所需壓力30分鐘。
4.停止加熱，緩慢減壓
在0.11-0.12兆帕壓力下．滅菌30分鐘后，停止加溫，待壓力自然下降到0時打開放氣閥，緩慢排出殘留蒸汽；然后打開鍋蓋，待熱蒸汽冷卻片刻后，取出滅菌物品。
滅菌完后，若連續使用，應注意補足水分后再用。若暫時不用，應排出鍋內剩余水分，清理干凈，下次備用。
二、食用菌接種場所的消毒方法
首先，將接種箱、接種室或者接種帳的衛生打掃干凈；然后放入所有用具及母種培養基，用甲醛和高錳酸鉀熏蒸消毒。藥品用量為每立方米甲醛10毫升，高錳酸鉀5克。
熏蒸后的接種箱、接種室或者接種帳還可用紫外線輔助殺菌，一般10立方米的空間，用30瓦的紫外線燈照射30分鐘，待臭氧散去，即可開始接種。
若采用超凈工作臺接種，首先要將超凈工作臺用清潔的水和干凈的抹布擦洗干凈，然后再用75%的酒精擦拭，放入接種用具和母種培養基，開機吹無菌風30分鐘。
三、食用菌菌種消毒后的培養
通過加溫、通風、灑水、遮光等方法，保持培養室（箱）溫度20℃-24℃；空氣相對濕度在60%左右；暗光；空氣新鮮，促使菌絲健壯生長。經2-3天，即可在接種塊上萌發出大量菌絲，經7-10天即可長滿培養基斜面。
在培養期間每隔2-3天檢查一次菌絲生長情況，若發現有雜菌污染或生長不正常的試管，立即挑出并淘汰。
長滿的菌種可用于進一步擴繁，若暫時不用可放置在20℃-40℃的冰箱中冷藏備用。
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