母種→原種
購買試管母種時，要注意鑒別母種的優劣，仔細檢查試管中菌絲的生長情況，以免買到老化的母種。一般來說，健壯的母種表現為菌絲潔白、粗壯、尖端整齊。若菌絲干散或培養基收縮，瓶底有黃色積水，說明菌絲已老化，請勿購買。
從母種到原種，是菌種第一次擴大培養的過程。具體方法：
材料準備：試管母種、啤酒瓶（按照1個試管母種接種12個啤酒瓶的用量準備）；玉米粒或麥粒（按照1個啤酒瓶盛250～300克玉米粒或麥粒的用量準備）等。
操作過程：先處理培養料，若選用麥粒，需將其用水浸泡24小時（中間換3次水，以防酸化）；若選用玉米粒，因其種皮較厚，不易泡透，需將其煮熟后使用。注意，煮玉米粒時要把握好火候，既不能讓玉米粒“開花”，也不能外熟內生。
當啤酒瓶內裝入培養料的量為瓶的4/5時，用棉塞封口，外用牛皮紙包裹，以防高溫滅菌時蒸汽浸濕棉塞。而后將瓶子擺放到蒸鍋上高溫滅菌12小時左右。
滅菌完畢后，待瓶溫降至30℃，再將其轉移至無菌接種箱內進行接種，即用接種針從母種試管內挑起少許菌絲，快速放入啤酒瓶內，用棉塞封口，外用牛皮紙包裹。然后，把接種好的啤酒瓶放在溫度約25℃的室內保存，以促發菌絲生長。一般經過20～25天即可得到原種。
提醒：好的原種菌絲密集、潔白、長勢均勻、粗壯，呈棉毛狀，且有爬壁現象。原種長滿瓶后，需立即擴大繁殖為栽培種，否則一旦營養耗盡，菌絲就會衰老，甚至死亡。
原種→一級栽培種
原種擴大繁殖便為栽培種。但是由于原種數量較少，若直接轉移至菌袋內進行出菇生產，不僅因菌種少、菌勢弱而導致發菌期延長，還會因菌袋兩頭的生長速度不一致而導致出菇不均勻。故建議菇農采取先小袋后大袋的制種模式，即先將原種接種到小菌袋內進行小袋制種，而后再轉接至大菌袋內進行正式栽培，這樣一來就能保證有足夠的發菌速度和整齊度，且菌勢強，感染雜菌的幾率小。
材料準備：一級棉子殼（加水濕潤，直至手握時指縫有水而不下滴為宜，加入適量的石灰調節酸堿度，攪拌均勻即可）；小菌袋（規格18厘米×40厘米×0.03厘米或22厘米×45厘米×0.04厘米的聚乙烯塑料袋，用量按照1個啤酒瓶分裝10個小菌袋準備）等。
操作過程：先把事先備好的培養料棉子殼裝入小菌袋中，兩頭扎緊，然后置于蒸鍋上高溫滅菌，當溫度達到100℃時持續20小時。滅菌完畢后，將其置于通風陰涼處降溫，當溫度在30℃以下時即可接種。為了便于接種，可用接種匙把啤酒瓶內的原種全部倒在小盆內，或先用膠帶在啤酒瓶上纏幾圈，而后把瓶子擊破，將碎玻璃去除，把原種裝入小盆內待用。接種時，用接種匙把原種裝入小菌袋的兩頭即可。最后要把接好種的小菌袋放置于溫度較恒定的地方培養，一般20天左右菌絲可長滿全袋。
提醒：在擺放接好種的小菌袋時要注意，由于菌袋中還殘存余熱，且菌絲在生長中也會產生大量的熱量。因此不宜堆放過高，一般呈“井”字形堆放3～4層即可，以利于通風散熱，避免“燒菌”。另外，一級栽培種在培養過程中要經常進行翻袋，防止熱量積聚，同時也要檢查菌絲生長情況及有無感染等，一般整個培養過程翻袋3次即可。菌絲長滿后需立即轉接至大菌袋，不然易造成菌絲老化，降低其生產效能。
一級栽培種→二級栽培種
目前平菇栽培多以生料栽培為主，培養料以棉子殼為主，另外適量加入玉米心、麩皮、石灰或石膏、糖或玉米面、微量元素、無機鹽等，以使營養全面、均衡。由于為生料栽培，故培養料用前要進行藥劑殺菌處理。方法：在培養料加水摻混時，拌入克霉靈（二氯異氰尿酸鈉），每0.5公斤克霉靈拌500公斤培養料，然后用塑料薄膜將其覆蓋，悶12小時左右，最后，將培養料分裝于大菌袋中即可。注意，該環節宜采用 “四層菌種三層料”的方式進行分裝播種，以加快發菌速度，提高出菇效果。按照此方法，一小袋栽培種可分裝2～3個大菌袋。
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